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    分享一下肝癌耐藥細胞培養小技巧
    更新時間:2021-04-25 點擊次數:1070次
      肝癌耐藥細胞的建立就是體外低濃度培養細胞,逐漸誘導耐藥。可是整個過程耗時長,易受汙染,成功率一般。後來了解到還可以通過裸鼠荷瘤的方式,給裸鼠腹腔注射藥物逐漸誘導耐藥,zui後取瘤組織研碎製成細胞懸液在再培養幾代可得腫瘤細胞。這樣時間就縮短了很多~而且不受汙染等條件限製。肝癌耐藥細胞的建立實驗是通過細胞與低劑量的藥物長期接觸,引起細胞本身生物化學過程的改變,細胞膜上出現Pgp(或P-170)糖蛋白,使細胞逐漸對藥物耐受。
     
      肝癌耐藥細胞培養小技巧:
     
      1.買細胞要去靠譜的地方買,比如ATCC或者然泰生物。一般上麵會有針對細胞的介紹,這樣培養之前可以了解細胞正常生長的狀態圖、傳代、培養基的類型等。
     
      2.不管是買的細胞,還是別人惠贈的細胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體汙染;迅速擴增凍存,凍存細胞複蘇後第二天更換一次培養基。
     
      3.發現細胞有汙染迅速處理掉,特別是當你養了很多種細胞時。細菌汙染、真菌汙染很容易發現,支原體汙染的話,細胞會長的慢,可以買個支原體檢測的茄子视频黄版定期檢測一下。
     
      4.不同細胞生長周期不同。有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經足夠了。有的又是特別慢,比如BT474,傳代是一分二,複蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養細胞的過程中多多摸索。
     
      5.對於嬌弱的細胞,就得細心嗬護。胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉速和時間。每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況。記住,是每天。
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